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实验室常用灭菌方法

日期:2020-03-30 19:04

  实验室常用灭菌方法_医药卫生_专业资料。实验室常用灭菌方法 1.高压蒸汽灭菌 为湿热灭菌方法的一种。是微生物培养中最重要的灭菌方法。这种灭菌方法 是基于水在煮沸时所形成的蒸汽不能扩散到外面去,而聚集在密封的容器中,在 密闭的情况下,随着水的

  实验室常用灭菌方法 1.高压蒸汽灭菌 为湿热灭菌方法的一种。是微生物培养中最重要的灭菌方法。这种灭菌方法 是基于水在煮沸时所形成的蒸汽不能扩散到外面去,而聚集在密封的容器中,在 密闭的情况下,随着水的煮沸,蒸汽压力升高,温度也相应增高。(PV=nRT) 高压蒸汽是最有效的灭菌法,能迅速地达到完全彻底灭菌。一般在 15 磅/ 英寸 2 压力下(121.6℃),15~30 分钟,所有微生物包括芽孢在内都可杀死。 它适用于对一般培养基和玻璃器皿的灭菌。 进行高压蒸汽灭菌的容器是高压蒸汽灭菌锅。 高压蒸汽灭菌锅是一个能耐压 又可以密闭的金属锅,有立式与卧式两种。 可以用电热、煤气、蒸汽等。立即博v88,锅上装有压力表,有的还装有温度计,能及时 了解锅内压力及温度。锅上还设有排气口,其作用是在密闭之前,利用蒸汽将锅 内的冷空气排净,另外还装有安全活门,如果压力超过一定限度,活门即可自动 打开,放出过多的蒸汽。 2.干热灭菌 微生物培养中常用的干热灭菌是指热空气灭菌。一般在电烘箱中进行。干热 灭菌所需温度较湿热灭菌高,时间也较湿热灭菌长。这是因为蛋白质在干燥无水 的情况下不容易凝固。一般须在 160℃左右保持恒温 3~4 小时,方能达到灭菌 的目的。 干热灭菌适用于空玻璃器皿的灭菌,凡带有橡胶的物品和培养基,都不能进 行干热灭菌。 3.间歇灭菌 各种微生物的营养体在 100℃温度下半小时即可被杀死。 而其芽孢和孢子在 这种条件下却不会失去生活力。间歇灭菌就是根据这一原理进行的。 间歇灭菌的方法是用 100℃、30 分钟杀死培养基内杂菌的营养体,然后将 这种含有芽孢和孢子的培养基在温箱内或室温下放置 24 小时,使芽孢和孢子萌 发成为营养体。这时再以 100℃处理半小时,再放置 24 小时。如此连续灭菌 3 次,即可达到完全灭菌的目的。 间歇灭菌通常在流动蒸汽的灭菌锅中进行,也可用普通铝锅代替。这种灭菌 方法多用于明胶、牛乳等物质的灭菌,这类物质在 100℃以上的温度下处理较长 时间,会被破坏,而用间歇灭菌法就既起到了杀菌作用,又使被处理的物质免遭 破坏。 4.紫外线nm)的部分。无菌室缓冲间 和接种箱常用紫外线灯作空气灭菌。无菌室和缓冲间的照射时间为 20~50 分钟 (视房间大小而定),接种箱照射 10~15 分钟即可。 为了加强紫外线灭菌的效果,在照射前,可在无菌室、缓冲间或接种箱内喷 洒 5%石炭酸,以使空气中附着有微生物的尘埃降落,同时也可以杀死一部分微 生物。无菌室的工作台的台面和椅子,可用 2~3%的来苏儿擦洗。然后再照射 紫外线。由于紫外线对人体有伤害作用,所以人不要直视正在照射的紫外线灯, 也不要在照射情况下进行工作。 灭菌后,为了检验紫外线的灭菌效果,可以在无菌室、缓冲间或接种箱内放 一套盛有培养基的培养皿,将皿盖打开 5~10 分钟,盖好后,放入温箱中培养。 如果只有一、二个菌落,可认为灭菌效果良好。如杂菌丛生。则需延长照射时间 或同时加强其它灭菌措施。